USO DE NUEVAS METODOLOGÍAS EN LA PRÁCTICA CLÍNICA: ESTUDIO DE LA AMPLIFICACIÓN DEL ONCOGÉN HER2 CON HIBRIDACIÓN IN SITU CROMOGÉNICA Y CON PLATA (DUAL ISH) EN EL CÁNCER DE MAMA

Resumen

RESUMEN

Introducción: La determinación del oncogén HER2 es crítica en las pacientes que responderán al anticuerpo monoclonal humanizado Trastuzumab. La técnica de hibridación in situ cromogénica y con plata (Dual ISH) ha sido exitosamente probada en la detección de la amplificación del gen HER2, un importante biomarcador del cáncer de mama que combina las ventajas de la automatización y la microscopía de luz, mejorando el flujo de trabajo en el laboratorio. Objetivos: verificar si la metodología automatizada de hibridización in situ cromogénica y con plata (Dual ISH) realizada en el equipo Benchmark XT de Ventana Medical Systems® puede ser comparable con la hibridización in situ fluorescente (FISH) en casos de la Fundación Valle del Lili. Metodología: Previa aprobación del Comité de Ética de la Fundación Valle del Lili, evaluamos un total de 42 casos, encontrando 98.1% con un nivel de concordancia total, tanto de la hibridización in situ fluorescente (FISH) y de la inmunohistoquímica (IHQ) con el ISH Dual. Determinamos un nivel de concordancia del 94.4% en el estudio del nivel de amplificación del gen HER2 por FISH y por ISH Dual. La concordancia entre la determinación de la expresión de la proteína HER2 por IHQ y por ISH Dual fue del 100%. Al evaluar nuestro coeficiente Kappa este fue de 0.97 y nuestro coeficiente de correlación intraclases en referencia con el FISH fue casi perfecto 0.85. Conclusión: nosotros observamos una reducción del tiempo de procesamiento con la técnica Dual ISH al ser una metodología automatizada (Equipo BenchMark XT de Ventana®) cuando la comparamos con el protocolo FISH. La técnica Dual ISH permite la evaluación morfológica y estudia simultáneamente el centrómero del cromosoma 17 y el oncogén HER2. Esta metodología se estudia en el microscopio de luz (60x), es cuantitativa, se puede archivar y se encuentra aprobada por la Administración de Drogas y Alimentos de los Estados Unidos (FDA).

Palabras clave: HER2, hibridización, cáncer de mama.

USE OF NEW METHODOLOGIES IN CLINICAL PRACTICE: STUDY WITH AMPLIFICATION OF HER2 ONCOGENE WITH IN SITU CHROMOGENIC AND SILVER HYBRIDIZATION (ISH DUAL) IN BREAST CANCER

ABSTRACT

Introduction: Determination of HER2 oncogene is critical in patients who will respond to the humanized monoclonal antibody, Trastuzumab. Chromogenic and silver in situ hybridization technique (Dual ISH) has successfully proved to detect HER2 gene amplification, an important breast cancer biomarker with the combined advantages of automation and light microscopy, thus improving workflow in the laboratory. Objectives: To determine whether the chromogenic and silver in situ hybridization automated methodology (Dual ISH) using XT Ventana Benchmark® can be comparable with the fluorescent in situ hybridization (FISH) in cases seen at the Valle del Lili Foundation. Methodology: Prior approval of Ethics Committee of the Valle del Lili Foundation, we evaluated a total of 42 cases, finding 98.1% with a level of total concordance of both fluorescent in situ hybridization (FISH) and immunohisto-chemistry (IHC), with Dual ISH. We also found 94.4% level of concordance when analysing the level of HER2 gene amplification by FISH and by Dual ISH. The concordance of determination of HER2 protein expression by both IHC and Dual ISH was 100%. Our Kappa coefficient was 0.97 and the intraclass correlation coefficient was a near perfect 0.85, compared with our FISH reference. Conclusion: We observed a reduction in processing time with Dual ISH technique -since this is an automated methodology (using a Ventana Medical Systems Benchmark XT® equipment) - when compared with the FISH protocol. Dual ISH technique allows morphological evaluation, simultaneously studying both the centromere of chromosome 17 and HER2 oncogene. This quantitative methodology is carried out with light microscope (60x), it can be filed and is FDA (Food and Drug Administration) approved.

Key words: HERS2, hybridization, breast cancer.